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細(xì)胞在發(fā)生凋亡時(shí)，會(huì)激活一些DNA內(nèi)切酶，這些內(nèi)切酶會(huì)切斷核小體間的基因組DNA。細(xì)胞凋亡時(shí)抽提DNA進(jìn)行電泳檢測(cè)，可以發(fā)現(xiàn)180-200bp的DNA ladder。基因組DNA斷裂時(shí)，暴露的3’-OH可以在末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶(Terminal Deoxynucleotidyl Transferase, TdT) 的催化下加上 標(biāo)記的dUTP ，從而可以通過(guò)熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀進(jìn)行檢測(cè)，這就是TUNEL (TdT-mediated dUTP Nick-End Labeling) 法檢測(cè)細(xì)胞凋亡的原理。

對(duì)不同組織切片先增加細(xì)胞膜通透性，然后讓 rTDT 和生物標(biāo)記的 dTUTP 進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)，在 rTDT 的輔助下 dTUTP 與核斷裂的 DNA 3’-OH結(jié)合，再用 HRP 標(biāo)記的鏈霉親和素與 dTUTP 上的 biotin 結(jié)合（每個(gè)鏈霉親和素至少可以再結(jié)合 3 個(gè) biotin 分子），最后用 DAB、過(guò)氧化氫與 SP 上的辣根過(guò)氧化物酶 HRP 發(fā)生氧化、環(huán)化反應(yīng)，形成苯乙肼聚合物而呈現(xiàn)棕褐色，最終通過(guò)計(jì)數(shù)每張切片上不同視野中 TUNEL 陽(yáng)性細(xì)胞的比例來(lái)判斷細(xì)胞凋亡發(fā)生情況。