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基因的產(chǎn)物——蛋白質(zhì)，反應(yīng)了生命活動(dòng)正在發(fā)生的事情。蛋白質(zhì)組成及含量變化的研究愈演愈烈。在蛋白質(zhì)組學(xué)研究中，一方面，WB、ELISA這些依賴于抗體的檢測(cè)方法，對(duì)抗體質(zhì)量要求極高。另一方面，基因水平的表達(dá)與蛋白含量的變化相關(guān)性較差。這些傳統(tǒng)的方法都給蛋白含量的分析帶來(lái)了困難。在這個(gè)大時(shí)代背景之下，MRM/PRM堪稱“質(zhì)譜界的WB、定量金標(biāo)準(zhǔn) 、U盤(pán)中的‘?dāng)?shù)字化抗體’”便應(yīng)運(yùn)而生。

MRM/PRM簡(jiǎn)介

PRM（平行反應(yīng)監(jiān)測(cè), Parallel Reaction Monitoring），靶向蛋白質(zhì)組，是一種基于高分辨、高精度質(zhì)譜的靶向定量技術(shù)，能夠?qū)δ繕?biāo)蛋白質(zhì)/肽段（以及含有修飾的肽段）進(jìn)行選擇性檢測(cè)，從而實(shí)現(xiàn)對(duì)目標(biāo)蛋白質(zhì)/肽段的精準(zhǔn)定量。借用聽(tīng)來(lái)的一個(gè)比喻來(lái)說(shuō)，靶向蛋白質(zhì)組掃描就像精準(zhǔn)狙擊，排除干擾，目標(biāo)明確，每一槍直指目標(biāo)。

其基本原理是：四級(jí)桿（Q）首先選出的目標(biāo)肽段離子，進(jìn)入碰撞室中打碎后，所有的碎片離子經(jīng)過(guò)質(zhì)量分析器產(chǎn)生一張高分辨的二級(jí)質(zhì)譜圖，通過(guò)提取其中的碎片離子信息即可實(shí)現(xiàn)目標(biāo)肽段的定量。

MRM/PRM技術(shù)特點(diǎn)

（1）靈敏度、重現(xiàn)性和準(zhǔn)確度高，定量范圍可達(dá)到5個(gè)數(shù)量級(jí)，定量重現(xiàn)性CV<10%, 相對(duì)誤差<15%。
（2）與經(jīng)典的Westernblot、ELISA 技術(shù)相比，不需要使用抗體，獲得更為準(zhǔn)確和重現(xiàn)的定量驗(yàn)證結(jié)果。
（3）在一個(gè)小時(shí)檢測(cè)時(shí)間內(nèi)可同時(shí)實(shí)現(xiàn)50個(gè)蛋白質(zhì)的定量檢測(cè)。
（4）MRM/PRM可直接檢測(cè)二級(jí)所有離子，減少了子離子的挑選和優(yōu)化過(guò)程。

MRM/PRM應(yīng)用范圍

目標(biāo)蛋白質(zhì)/肽段相對(duì)或絕對(duì)定量，蛋白質(zhì)翻譯后修飾的定性定量研究。
（1）定量蛋白質(zhì)組學(xué)（iTRAQ、label-free、SILAC）后，目標(biāo)蛋白需驗(yàn)證
（2）要做WB，卻苦于沒(méi)有抗體
（3）有多個(gè)蛋白質(zhì)需同時(shí)定量
（4）功能研究中涉及到蛋白質(zhì)定量

在應(yīng)用時(shí)，一方面，使蛋白質(zhì)驗(yàn)證不再受制于商業(yè)化抗體，可以應(yīng)用于多種非模式生物。另一方面，使抗體驗(yàn)證能夠高通量的在大規(guī)模生物樣本上進(jìn)行，提高實(shí)驗(yàn)效率[1]